Лаборатория

ЛАБОРАТОРНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЯЙЦЕКЛЕТОК

Как яйцеклетки попадают в лабораторию?

Один раз взятые яйцеклетки переносятся в лабораторию в стерильной пробирке, погружённые в фолликулярную жидкость и окружённые кумулусом (структура, образованная фолликулярными клетками). После проводятся их микроскопическое исследование, промывание, а затем их помещают в инкубатор с температурой среды 37ºС.

Какого качества яйцеклетки, взятые в течение одного донорского цикла?

Каждая из яйцеклеток уникальна и неповторима в каждом отдельном случае и, разумеется, все они не могут быть одинакового качества.Во время их исследования можно видеть около 80% зрелых яйцеклеток, пригодных к их применению в программе ЭКО, а также 20% незрелых и плохо сформированных яйцеклеток, которые в расчёт не принимаются.

ЛАБОРАТОРНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СПЕРМЫ

Когда производится забор спермы на пробу?

После забора яйцеклеток, мужчину просят представить образец его спермы путём мастурбации и эякуляции в стерильный сосуд, который выдаётся ему в Клинике. Руки и гениталии мужчины должны быть тщательно вымыты, во избежании контаминации семени.
Один раз взятый образец спермы, он передаётся биологам на маркировку и исследование, которое проводится не позже чем через час после эякуляции.

Может ли образец спермы быть заморожен сразу после первого посещения?

Конечно, мы даже советуем нашим пациентам делать это, так как это позволяет экономить их время.

И если воспользоваться Банком спермы?

Мы предоставляем донорское семя нашим пациентам, будь то женатая пара или незамужняя женщина. Более того, это гораздо удобнее, потому что семя уже готово для его применения в любой момент.

Как подготавливается сперма в лаборатории?

Сперму отделяют от плазмы и гиперактивируют, чтобы обеспечить оплодотворение яйцеклетки.

ПРОЦЕСС ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ

После культивации яйцеклетки, она контактирует со спермой. Существует два пути искусственного оплодотворения: традиционный метод и ИКСИ (инъекция сперматозоида в цитоплазму ооцита).

Традиционный метод

Наиболее часто используемый в мировой практике. Если в сперме нет никаких отклонений и у мужчина, сдавший её, имел детей в прошлом, применяют этот метод; он заключается в контакте яйцеклетки со сперматозоидами, из которых один проникает внутрь женской гаметы и обеспечивает её оплодотворение.
Процесс производится в среде с температурой 37ºС; концентрация подвижных сперматозоидов в препарате не ниже 100.000.

Метод ИКСИ

Метод инъекции сперматозоида в цитоплазму ооцита применяется при низком качестве образца мужского семени, а также если данный мужчина не имел потомства ранее.
в высшей степени сложный процесс, требующий от специалистов большого опыта и невероятной точности, ведь это, говоря языком поэтов, ‘вдохновение жизни’ в яйцеклетку.
ИКСИ показана для программы с использованием донорской яйцеклетки, независимо от качества спермы, чтобы обеспечить наиболее высокий результат

ПЕРВЫЙ ДЕНЬ ПОСЛЕ ЭК

Что наблюдается на следующий день после проведения ЭКО?

17-20 часов после инсеминации яйцеклетки рассматривают под электронным микроскопом с x400 кратным увеличением, чтобы узнать, с каким результатом прошло оплодотворение.
В оплодотворившейся яйцеклетке (зиготе) наблюдаются два про-ядра: генетические коды женщины и мужчины, по 23 хромосомы в каждом.

Наблюдая фолликулы в электронный микроскоп, можно выявить зиготы, а также непригодные для их дальнейшего использования неоплодотворившиеся и аномальные яйцеклетки.

Все ли яйцеклетки оплодотворяются при их инсеминации?

В нормальных условиях, используя семя эякулята, доля оплодотворившихся фолликулов путём ЭКО и ЭКО-ИКСИ равна 70%.
Кроме того, иногда первый цикл ЭКО проводится с целью выявить уровень фертильности пары. Иногда мы сталкиваемся с низким уровнем фертильности-5-20%, а порой и с полным её отсутствием.

Хромосомные аномалии эмбриона?

При зачатии ребёнка в старшем возрасте риск хромосомных аномалий эмбриона увеличивается.
В общем и целом процент данных аномалий эмбриона, полученного путём ЭКО не выше, чем в случае естественного процесса.
При использовании программы ЭКО-ИКСИ процент аномалий и того ниже, так как их единственным патогенным фактором иногда может выступить сперматозоид, оплодотворивший яйцеклетку.

ВТОРОЙ ДЕНЬ ПОСЛЕ ЭК

Наблюдения в электронный микроскоп?

На второй день после оплодотворения наблюдается первое деление зиготы, образуя эмбрион. В течение 48 часов, последующих за ЭКО, он может находиться на 2-х, 3-х, 4-х или 5-и клеточной стадии развития с варьирующимся процентом фрагментации.

ТРЕТИЙ ДЕНЬ ПОСЛЕ ЭК

Как выглядит эмбрион на третий день после ЭКО?

Со второго дня на третий количество бластомеров должно удвоиться и эмбрион должен находиться на 7и-9-и клеточной стадии развития. Процент фрагментации может варьироваться. Некоторые эмбрионы блокируют деление бластомеров между вторым и третьим днём и останавливают своё развитие.

Все эмбрионы одинаковы?

Абсолютно идентичных эмбрионов не существует, так же, как и абсолютно одинаковых людей, и каждый из них имеет свои генетические и морфологические особенности. Не все эмбрионы из одного и того же цикла обладают одинаковыми качествами.
Полученных в результате ЭКО эмбрионов тщательно изучают под электронным микроскопом с x400 кратным увеличением и классифицируют по их морфологическим признакам (скорость клеточного деления, форма бластомеров, процент фрагментации).
Затем их оценивают по 10-и балльной шкале; ‘десятку’ получают лучшие эмбрионы по следующим признакам:
4 бластомера правильной формы, отсутствие фрагментации – после второго дня культивирования;
7-9 бластомеров правильной формы, отсутствие фрагментации-после третьего дня культивирования.

Что происходит с невостребованными эмбрионами? Можно ли сохранить их?

Эмбрионы с хорошими морфологическими данными, которые не были востребованы для их трансплантации, замораживаются в жидком азоте при температуре -196ºС и таким образом их можно сохранять в течение продолжительного времени.

Сколько времени могут храниться криоконсервированные эмбрионы?

Если соблюдаются все условия для их стабильного хранения в криогенной камере, теоретически их можно сохранять в течение нескольких лет.
На данный момент мы располагаем данными о криогенной консервации в течение 8-ми лет с последующими блестящими результатами: рождение абсолютно здоровых детей!

Что говорит испанское законодательство о криоконсервировании эмбрионов?

В каждой стране, где практикуется данный вид криоконсервирования, существуют свои законы на эту тему.
Испанское законодательство, в частности, гласит, что по новому закону ‘О Вспомогательных Репродуктивных Технологиях’ за номером 45 от 22 ноября 2003 года ‘…в исключительных случаях при остаточном количестве эмбрионов, их можно сохранять в криоконсервированном виде в течение детородного возраста женщины. В этих случаях пациентка подписывает соглашение об ответственности по их криоконсервировании. Данное соглашение включает статью о том, что если эти эмбрионы не были использованы пациенткой или супружеской парой в течение обусловленного времени, в дальнейшем они единственно и безвозмездно могут быть направлены на репродуктивные цели’

С 1 января 2006 года испанское правительство планирует внести поправку этот в этот закон, с целью дать возможность пациентам выбирать между безвозмездной отдачей эмбрионов другим пациентам, их уничтожением или их передачей на научно-исследовательские цели.